A Glimpse into Chilean Veterinary Anatomy Educators / Un Vistazo a los Educadores de Anatomía Veterinaria Chilenos

SUMMARY: In veterinary medicine, impressive technological advances in biochemistry, genetics and molecular biology have led to a reduction in the amount of time spent teaching anatomy and a shift toward anatomical research. As classically trained veterinary anatomists began to retire at the beginning of the 2000s, it became evident that there would be a shortage of qualified anatomists. This coincides with the increase in the hiring of recent graduates with general education experience and no specialization in the area. The aim of the study is to characterize the Chilean veterinary anatomy educator with an emphasis on their training and the academic environment they work in. Data were collected through a survey targeting a diverse population of university educators who teach content related to veterinary anatomy in Chile. The results showed that the Chilean veterinary anatomist has reached the master's level, with a wide range of continuous training experiences, from which it is perceived that he has acquired his anatomical and teaching skills. Furthermore, despite his self-perception as an educator/researcher, the evidence showed that research in veterinary anatomy is still in its infancy. However, strengths were identified related to the varied use of teaching resources, participation in the community and the dissemination of anatomical knowledge.

En medicina veterinaria, los impresionantes avances tecnológicos en bioquímica, genética y biología molecular han llevado a una reducción en la cantidad de tiempo dedicado a la enseñanza de la anatomía y un cambio hacia la investigación anatómica. Cuando los anatomistas veterinarios de formación clásica comenzaron a jubilarse a principios de la década de 2000, se hizo evidente que habría escasez de anatomistas cualificados. Esto coincide con el incremento en la contratación de recién egresados con experiencia en educación general y sin especialización en el área (licenciados, tesistas, etc.). El objetivo del estudio es caracterizar al educador de anatomía veterinaria chileno con énfasis en su formación y el ambiente académico en el que se desempeña. Los datos fueron recolectados a través de una encuesta dirigida a una población diversa de docentes universitarios que imparten contenidos relacionados con la anatomía veterinaria en Chile. Los resultados muestran que el anatomista veterinario chileno ha alcanzado el nivel de maestría, con una amplia gama de experiencias de formación continua, a partir de las cuales se infiere que ha adquirido sus competencias anatómicas y docentes. A pesar de su autopercepción como educador/investigador, la evidencia demostró que la investigación en anatomía veterinaria aún se encuentra en ciernes. No obstante, se identificaron fortalezas en actividades relacionadas con el uso variado de recursos didácticos, la participación en la comunidad y la difusión del conociminto.

Immunofluorescence Analysis of Estrogen and Progesterone Receptors and Ki-67 Nuclear Protein in Canine Uteri Treated with Medroxyprogesterone Acetate During Anestrus / Análisis de Inmunofluorescencia de Receptores de Estrógeno y Progesterona y Proteína Nuclear Ki-67 en Úteros Caninos Tratados con Acetato de Medroxiprogesterona Durante el Anestr

SUMMARY: Estradiol and progesterone receptors play an essential role in the changes occurring in the uterus during the estrus cycle in dogs (Canis lupus familiaris). In order to investigate the potential effect of progestational agent medroxyprogesterone acetate (MPA) when is used during anestrus on the expression of estradiol receptors [ER], progesterone receptors [PR] and nuclear protein Ki67, we evaluated uterine tissue immunohistochemically. Uteri were grouped as nulliparous (control, n=11), multiparous (n=11) and treated with MPA (n=11; nulliparous with two treatments; 5mg/kg; i.m.). The amount and location of PR, ER and Ki67 were studied on the epithelial surface, apical and basal regions of the endometrium and myometrium using immunohistochemical techniques with a spectral confocal microscope and analyzed by ANOVA. Differences in ER were observed between the multiparous and MPA-treated groups in the apical region of the endometrium (p=0.0022). Differences in cell proliferation were detected between the nulliparous and multiparous groups (p=0.0037) and nulliparous and MPA-treated groups (p=0.0003) in the basal region of the endometrium. In conclusion, two doses of MPA (5mg/kg; i.m.) do not have a significant effect on the expression of ER and PR; however, they inhibit cell proliferation in the basal region of the endometrium, which includes the stroma, subepithelial cell layer, compact layer, and spongy layer. The clinical and long-term effect of this treatment should be evaluated in subsequent studies.

Los receptores de estradiol y progesterona juegan un rol fundamental en los cambios que se producen en el útero durante el ciclo estral de las perras (Canis lupus familiaris). El objetivo de este estudio fue evaluar las expresiones de ER-a y PR en el útero y la proliferación de células endometriales detectando la expresión nuclear de la proteína Ki67 en perras expuestas a la progestina sintética MPA y compararlas con perras nulíparas y multíparas expuestas a progesterona luteal. Úteros fueron agrupados como nulíparas (control, n=11), multíparas (n=11) y tratadas con MPA (n=11; nulíparas con dos tratamientos; 5 mg/kg; i.m.). La expresión de PR, ER-a y Ki67 fue evaluada en la regiones apicales y basales del endometrio y miometrio con un microscopio confocal espectral. Se observó diferencias en ER-a entre los grupos multíparas y tratados con MPA en la región apical del endometrio (p=0,0022). Se detectaron diferencias en la proliferación celular entre los grupos de nulíparas y multíparas (p=0,0037) y los grupos de nulíparas y tratados con MPA (p=0,0003) en la región basal del endometrio. En conclusión, dos dosis de MPA (5mg/kg; i.m.) no tienen un efecto significativo sobre la expresión de ER y PR; sin embargo, inhiben la proliferación celular en la región basal del endometrio, el cual incluye a estroma, capa de células subepiteliales, estratos compacto y esponjoso. El efecto clínico a largo plazo de este tratamiento debe ser evaluado en estudios posteriores.

Evaluación de la mineralización en mandíbula y diente de trucha arcoíris (Oncorhynchus mykiss) mediante microscopía electrónica de barrido de presión variable acoplada a detector de espectroscopía de rayos X de energía dispersiva / Evaluation of mineralization in jaw and teeth of rainbow trout (Oncorhynchus mykiss) using variable pressure scanning electron microscopy coupled to energy-dispersive X-ray spectroscopy detector

RESUMEN: En salmonicultura se utilizan imágenes de rayos X, para evaluar la columna vertebral y las aletas, pero estas no permiten cuantificar los minerales que constituyen el hueso, para esto se utilizan otras técnicas que son destructivas. La Microscopía Electrónica de Barrido de presión variable (VP SEM) acoplada al detector espectroscopia de rayos X de energía dispersiva (EDX) acoplado, nos permite analizar la microestructura y a la vez determinar elementos químicos, porcentaje y distribución presentes en puntos específicos en una muestra. Se utilizaron 5 truchas control y 5 con deformidad mandibular, de agua dulce en etapa de smolt, se analizó la estructura y mineralización del hueso, se eligieron en promedio 6 puntos de cuantificación por región de interés y se analizaron mediante Microscopía Electrónica de Barrido (VP SEM-EDX). Los datos obtenidos muestran porcentaje en masa de Ca promedio en hueso articular de truchas fueron de 8.07 % y de 14.48 % en truchas con deformidad mandibular y control respectivamente y el porcentaje en masa promedio de P es de 4.07 % y 7.60 %, en truchas con deformidad mandibular y control respectivamente. Se identificó además otros elementos presentes en la muestra como Mg, Na, C, O, N, S, F, Zn, Al y Fe, con especial interés en el aumento de carbono en las muestras analizadas con deformidad mandibular y la presencia de aluminio en todas las muestras. La Técnica de VP SEM-EDX, permite evaluar de forma directa, sin destrucción de la muestra y con una preparación mínima de la muestra. En el hueso, la aplicación más frecuente de SEM-EDX es la medición del contenido de Ca y P y la relación que existe entre estos elementos Ca/P, en la muestra. Paralelamente la técnica nos permite la detección de otros microelementos provenientes del agua o de la alimentación y que eventualmente pueden provocar alteraciones en los peces, confirmando la hipótesis que el microanálisis elemental tiene utilidad para la salmonicultura.

SUMMARY: In salmon farming systems, X-ray images are used to evaluate the spine and fins, but these do not allow quantifying the minerals that make up the bone, for different techniques that are destructive are used. Variable Pressure Scanning Electron Microscopy (VP SEM) coupled to an Energy Dispersive X-ray spectroscopy detector (EDX), allows us to analyze the microstructure and at the same time determine chemical elements, percentages, and distribution present at specific points in a sample. Five control and five jaw deformity trout, from freshwater and in the smolt stage were used. The structure and mineralization of the bone were analyzed, an average six quantification points were chosen per region of interest (ROI) and then they were analyzed by Scanning Electron Microscopy (VP SEM-EDX). The data obtained have shown the average mass percentage of calcium in trout joint bone was 8.07 % and 14.48 % in jaw deformity and control trout, respectively; and the average mass percentage of phosphorus is 4.07 % and 7.60 %, in jaw deformity and control trout, respectively. Other elements present in the sample were also identified, such as magnesium, sodium, carbon, oxygen, nitrogen, sulphur, fluorine, zinc, aluminium, and iron, with special interest the increase of carbon in the analyzed samples with mandibular deformity and the presence of aluminum in all samples. The VP SEM-EDX Technique allows direct evaluation, without destruction of the sample and with minimal sample preparation. In bone, the most frequent application of SEM-EDX is the measurement of the content of calcium (Ca) and phosphorus (P) and the relationship that exists between these elements, calcium/phosphorus (Ca/P), in the sample. At the same time, the technique allows us to detect other microelements from water or food that can eventually cause alterations in fish, confirming the hypothesis that elemental microanalysis is useful for salmon farming.

Profile of morphology teachers in Chilean universities / Perfil de los docentes de morfología en universidades chilenas

SUMMARY: University teaching in Chile has been influenced in recent decades by changes to the education system, which has increased universities and academic offerings and, therefore, the demand for new instructors. Teaching morphological sciences has not been exempt from these changes, with new instructors needed to fill the growing offerings of programs that include anatomy, embryology and histology. The aim was to understand the profile of the academics teaching morphology in Chile in 2020. A voluntary online survey was applied to 213 university morphology teachers, in which information was collected on professional and academic training, geographical distribution, gender, continuing academic education and employment situation. Overall, the results show that 65.9 % of instructors were men and 35.1 % women, and most (34.6 %) had between 5 and 10 years in morphology, and a master's degree was predominant (53.27 %). In the area of anatomy, 46 % of instructors were physiotherapists and 24.6 % dentists, whereas in the areas of histology and embryology, the group was diverse. In terms of employment, 49.06 % stated they worked full time, mainly in teaching.41.31 % of the instructors were concentrated in the Metropolitan Region. There was no association between gender and graduate training, maximum academic degree attained, type of workday or academic profile, but there was one by disciplinary area. The conclusion drawn is that morphology teachers in Chilean universities are part of a wide range of professionals dedicated to different disciplinary areas, with master's degree and/or specialization, located mainly in the Metropolitan Region. This multidisciplinary profile demonstrates the mainstreaming of morphology teaching in Chile.

RESUMEN: La docencia universitaria en Chile se ha visto influenciada en las últimas décadas por modificaciones del sistema educativo, las cuales generaron un incremento de universidades y oferta académica y, por ende, demanda de nuevos docentes. La enseñanza de las ciencias morfológicas no ha quedado exenta de estos cambios, teniendo que enfrentar la necesidad de nuevos docentes requeridos para suplir la creciente oferta de programas que incluyen a la anatomía, embriología e histología. El objetivo fue conocer el perfil de los académicos que realizaron docencia de morfología en Chile el año 2020. Se aplicó una encuesta online voluntaria a 213 académicos universitarios de morfología, en la cual se recopiló información sobre formación profesional, académica, distribución geográfica, género, perfeccionamiento académico y situación laboral. Los resultados, en general, muestran que el 65,9 % de los docentes eran hombres y un 35,1 % mujeres, los que en su mayoría (34,6 %) tenían entre 5 y 10 años vinculados a la morfología y donde prevalecía el grado académico de magíster (53,27 %). En el área de la anatomía el 46 % de los docentes correspondió a kinesiólogos y el 24,6 % a odontólogos, mientras que, en las áreas de histología y embriología el grupo fue misceláneo. En el ámbito laboral el 49,06 % declaró tener jornada completa, destinada principalmente a la docencia. El 41,31 % de los docentes se concentró en la Región Metropolitana. No hubo asociación entre género y formación de postgrado, máximo grado académico alcanzado, tipo de jornada y perfil académico, pero si hubo por área disciplinar. Se concluye que los docentes de morfología en Chile pertenecen a un amplio espectro de profesionales dedicados a distintas áreas disciplinares, con formación de magíster y/o especialización, ubicados principalmente en la Región Metropolitana. Este perfil multidisciplinar demuestra la transversalidad de la docencia morfológica en Chile.

Polymorphisms in DSSP (rs36094464) and RUNX2 (rs566712) genes contribute to the susceptibility of dental caries in childhood / Los polimorfismos en los genes DSSP (rs36094464) y RUNX2 (rs566712) contribuyen a la susceptibilidad de la caries dental en la infancia

SUMMARY: Dental caries corresponds to an ecological and non-contagious, dynamic and chronic disease of multifactorial origin; currently there is evidence of how genetic factors could be included as predisposing agents to suffer it, however this evidence is diverse and incipient. a cross-sectional study was p erformed to investigate the possible associations of DSPP (rs36094464), RUNX2 (rs566712) and KLK4 (rs198968) polymorphisms in early childhood caries. Saliva samples of children (2-11years old) were collected and genotyped for DSPP (rs36094464), RUNX2 (rs566712) and KLK4 (rs198968) polymorphisms. Through the ceft index their caries history was determined and the gene variants were students through molecular biology techniques. polymorphisms of the DSSP (rs36094464) and RUNX2 (rs566712) are associated and contribute to the susceptibility of dental caries disease in early childhood, as they are related to their history of caries. KLK4 (rs198968) polymorphisms are not associated. In conclusions, the studied polymorphisms on DSSP and RUNX2 genes are associated with changes in the tooth microarchitecture, favoring the appearance of microlesions that would contribute to dental caries disease susceptibility in early childhood. Also, no association was found for the studied polymorphism of the KLK4 gene with dental caries disease susceptibility.

RESUMEN: La caries dental corresponde a una enfermedad crónica, no contagiosa, dinámica y de origen multifactorial. Actualmente existe evidencia de cómo los factores genéticos podrían incluirse como agentes predisponentes, sin embargo, esta evidencia es diversa e incipiente. Se realizó un estudio transversal para investigar las posibles asociaciones entre los polimorfismos DSPP (rs36094464), RUNX2 (rs566712) y KLK4 (rs198968) y la caries en la infancia. Se colectaron muestras de saliva de niños (de 2 a 11 años de edad) y se genotipificaron para los polimorfismos DSPP (rs36094464), RUNX2 (rs566712) y KLK4 (rs198968). Mediante el índice ceft se determinó su historial de caries y se estudiaron las variantes genéticas mediante técnicas de biología molecular. Los datos obtenidos indican que los polimorfismos del DSSP (rs36094464) y RUNX2 (rs566712) están asociados y contribuyen a la susceptibilidad de la enfermedad de caries dental en la infancia, ya que están - además - relacionados con el historial de caries. En conclusión, los polimorfismos estudiados en los genes DSSP y RUNX2 se asocian a la aparición de microlesiones que contribuirían a la susceptibilidad a la enfermedad de caries dental en la infancia. Creemos que este estudio es importante para la odontopediatría porque destaca el papel de DSSP (rs36094464) y RUNX2 (rs566712) y la susceptibilidad a la caries dental durante la infancia, además resalta la utilidad de la evaluación genética para la predicción y prevención de la caries dental y porque aporta evidencia que indica que los factores genéticos están implicados en la etiología de la caries.

Intrauterine and postnatal exposure to tobacco and wood smoke on hypothalamic development and cognition: an integrative review of the literature / Exposición intrauterina y postnatal al humo de tabaco y de leña en el desarrollo hipotalámico y la cognición: una revisión integrativa de la literatura

SUMMARY: Exposure to air pollution and its pollutants has been associated with important effects on human health since the first years of life, thus it has been seen that exposure to tobacco smoke and wood smoke is directly related to cardiovascular and pulmonary diseases, respiratory and cancers. However, exposure to air pollution during fetal development and its effects on brain structure and function during early childhood and adolescence have been little studied. In this review we have analyzed the literature on prenatal exposure to tobacco and wood smoke and its relationship with hypothalamic development and cognition in the first years of life.The molecular, morphological and physiological aspects of the relationship between pre- and postnatal exposure to tobacco and wood smoke with neural developmental, cognitive and behavioral problems during early childhood and adolescence have not yet been fully clarified. The information available in the scientific literature based on antecedents obtained from epidemiological studies has been negatively affected by confounding variables and great methodological challenges that make it impossible to affirm an exact causal relationship with certainty.

RESUMEN: La exposición a la contaminación del aire se ha asociado con importantes efectos en la salud humana desde los primeros años de vida. Estudios han demostrado con certeza que la exposición al humo de tabaco y humo de leña está directamente relacionada con enfermedades cardiovasculares, pulmonares, respiratorias y cánceres. Sin embargo, la exposición a la contaminación del aire durante el desarrollo fetal y sus efectos a posteriori sobre la estructura y función del cerebro durante la primera infancia y la adolescencia son aún desconocidos. En esta revisión analizamos la literatura sobre la exposición prenatal al tabaco y al humo de leña y su relación con el desarrollo hipotalámico y la cognición en los primeros años de vida. Los aspectos moleculares, morfológicos y fisiológicos de la asociación entre la exposición pre y postnatal al humo de tabaco o al humo de leña con problemas del desarrollo neurológico normal, cognitivos y de comportamiento durante la primera infancia y la adolescencia aún no se han aclarado completamente. La información disponible en la literatura científica basada en antecedentes obtenidos de estudios epidemiológicos ha sido afectada negativamente por variables de confusión y grandes desafíos metodológicos que hacen imposible afirmar una relación directa y causal exacta con certeza.

Impact of maternal exposure to wood smoke pollution on fetal lung morphology in a rat model / Impacto de la exposición materna a la contaminación por humo de leña en la morfología pulmonar fetal en un modelo de rata

SUMMARY: Residential heating with wood is an important source of ambient air pollution. Evidence links air pollution to serious health effects such as respiratory and cardiovascular mortality and morbidity. We hypothesized that prenatal exposure to wood smoke pollution causes morphological changes in the development of the rat lung, leading to altered lung structure and function during later life. We presumed that analysis of the fetal lung stereology provides novel insights into the underlying processes mediating particulate matter associated developmental changes and damage. The objective of the study was to investigate the effects of exposure during gestational period to wood smoke pollution on lung fetal morphology. To test this, pregnant rats were exposed during pregestational and gestational periods to wood smoke pollution. Complete lungs samples were obtained from 24 fetus from healthy female G3 rats subjected to cesarean at 19 days post-fecundation. The lungs were prepared for histological and stereological analysis. The volume fraction of terminal bronchioles VV [tb, lung] and volume fraction of parenchyma VV [par, lung], surface density of terminal bronchioles SV [tb, lung] as well as numerical density of bronchiolar exocrinocytes NA [ec,lung] were calculated by light microscopy. Statistical analysis detected significant differences between groups in volume density VV [tb, lung; %] (p=0.0012) and surface density SV [tb, lung; mm2/mm3] (p<0.0001) of the terminal bronchioles. However, it did not show differences between groups in the stereological parameter volume density VV [par, lung; %] (p=0.0838) and numerical density of bronchiolar exocrinocytes NA [ec,lung; nº/mm2] (p=0.0705). The analysis of the evidence obtained indicates that exposure to environmental pollution was affects lung maturation, and particularly the proportion and area of terminal bronchioles in the fetal lung. In conclusion, maternal exposure to wood smoke pollution during pregnancy was associated with a decrease in the lower conducting airways of lungs, which, according to urban pollution studies, could be related to early childhood lower respiratory illness. The public health implications of this study are that reducing or avoiding exposure to wood smoke is important before and during pregnancy.

RESUMEN: La calefacción residencial con leña es una fuente importante de contaminación ambiental. La evidencia vincula la contaminación del aire con graves efectos sobre la salud, como la mortalidad y la morbilidad respiratoria y cardiovascular. Hipotetizamos que la exposición prenatal a la contaminación por humo de leña causa cambios en el desarrollo del pulmón de rata, lo que conduce a una morfo-función pulmonar alteradas durante la vida posterior, creemos que el análisis de la estereología pulmonar fetal proporcionará nuevos conocimientos sobre los procesos subyacentes que median esos cambios. El objetivo del estudio fue investigar los efectos de la exposición prenatal a la contaminación ambiental por humo de leña sobre la morfología pulmonar fetal. Ratas preñadas fueron expuestas durante los períodos pregestacional y gestacional a la contaminación por humo de leña. En fetos de 19 días post-fecundación fue obtenido el pulmón para análisis histológico y estereológico. Fue determinado la fracción de volumen de bronquiolos terminales VV [tb, pulmón], fracción de volumen del parénquima VV [par, pulmón], densidad superficial de los bronquiolos terminales SV [tb, pulmón] así como la densidad numérica de exocrinocitos NA [ec, pulmón]. El análisis estadístico detectó diferencias significativas entre grupos en la densidad de volumen V [tb, pulmón; %] (p=0,0012) y densidad superficial SV [tb, pulmón; mm2/mm3] (p<0,0001) de los bronquiolos terminales. Sin embargo, no demostró diferencias entre grupos en la densidad de volumen VV [par, pulmón; %] (p=0,0838) y numérica de exocrinocitos bronquiolares NA [ec, pulmón; nº / mm ] (p=0,0705). El análisis de la evidencia obtenida indica que la exposición a la contaminación ambiental afectó la maduración pulmonar, y particularmente la proporción y área de bronquiolos terminales en el pulmón fetal. En conclusión, la exposición materna a la contaminación por humo de leña durante la gestación se asoció a una disminución de las vías respiratorias conductoras de aire en pulmón, lo que, según estudios de contaminación urbana, podría estar relacionado con enfermedades de las vías respiratorias inferiores en la primera infancia. Las implicaciones para la salud pública de este estudio son que reducir o evitar la exposición al humo de leña es importante previo y durante la gestación. Por otro lado, la contaminación por humo de leña tiene un gran impacto en la salud pública que, en teoría, es posible prevenir.

Exposure to wood smoke pollution during pre-gestational period of rat has effects on placenta volume and fetus size / La exposición a la contaminación por humo de leña durante el período pregestacional de la rata tiene efectos sobre el volumen de la placenta y el tamaño del feto

SUMMARY: Studies in humans showed that prenatal exposure to urban air pollution (AP) influences fetal development, and increases the incidence of adverse pregnancy outcomes and some diseases in postnatal life. However, most of these were performed in environments where the main source of environmental particulate matters (PM) emission is diesel combustion by motor vehicles and industries, thereby ignoring the effects produced by wood smoke pollution. We hypothesized that morphological changes in the placenta could contribute to the reduction in fetal size associated with different periods of exposure to AP produced by wood smoke pollution prior to and during pregnancy. The objective of the study was to investigate the quantitative effects of long-term exposure to environmental levels of wood smoke pollution on the macroscopic and microscopic morphology of the placenta in rats. To test this, pregnant rats were exposed during pregestational and gestational periods to wood smoke pollution in indoor and outdoor environments. At 19 days of gestation, the placentas were obtained by caesarean and were prepared for histological, planimetric and stereological analysis. The volume and proportions of the placental compartments were estimated. In addition, stereological estimators in fetal capillaries were calculated in the labyrinth region. Crown rump length, fetus weight and litter weight were influenced by pregestational and gestational exposure periods. Exposure to wood smoke pollution during pregestational period has significant effect on the volume of the placenta, and consequently on fetal height. In conclusion, this study demonstrated that long-term outdoor exposure to wood smoke pollution from residential heating affects fetal health, decreasing the absolute volume of the entire placenta and the placental interface between the mother and fetus, decreasing the total volume of blood vessels present in the labyrinth region ofthe placenta and affecting the size of the fetus.

RESUMEN: Estudios en humanos demostraron que la exposición prenatal a la polución del aire urbano influye en el desarrollo fetal y aumenta la incidencia de resultados adversos de la gestación y algunas enfermedades postnatales. Sin embargo, la mayoría de ellos fueron realizados en entornos donde la principal fuente de emisión de material particulado, fue la combustión de petróleo por vehículos a motor e industrias, ignorando los efectos producidos por el humo de leña producido por la calefacción intradomiciliaria. Hipotetizamos respecto a que los cambios de la placenta contribuirían a la disminución del tamaño fetal relacionado a los períodos de exposición al humo de leña durante los periodos pregestacional y gestacional. El objetivo del estudio fue investigar los efectos cuantitativos de la exposición al humo de leña sobre la morfología macroscópica y microscópica en placenta de ratas. Para probar esto, ratas preñadas fueron expuestas durante los períodos pregestacional y gestacional a la contaminación por humo de leña en ambientes interiores y exteriores. A los 19 días de gestación, las placentas fueron obtenidas por cesárea y fueron preparadas para un análisis histológico, planimétrico y estereológico. Fue estimado el volumen absoluto y las proporciones de los compartimentos placentarios. Además, fueron calculados estimadores estereológicos en capilares fetales del laberinto y trofoblasto. La longitud, el peso del feto y el peso de la camada fueron influenciados por los períodos de exposición pregestacional y gestacional. La exposición a la contaminación por humo de leñá durante el período pregestacional tuvo un efecto significativo en el volumen de la placenta y, en consecuencia, en la altura del feto. En conclusión, este estudio demostró que la exposición a largo plazo al humo de leña afecta la salud del feto, disminuyendo el volumen absoluto de la placenta, además, afecta la interfaz placentaria entre la madre y feto, disminuyendo el volumen total de vasos sanguíneos presentes en la región del laberinto placentario y por consecuente afectando el tamaño del feto.

Morphometric, anatomic and radiographic study of bone of the pelvic limb of endangered Patagonian huemul deer (Hippocamelus bisulcus) / Estudio morfométrico, anatómico y radiográfico de los huesos del miembro pélvico del huemul patagónico en peligro de extinción (Hippocamelus bisulcus)

Currently, the Patagonian huemul (Hippocamelus bisulcus) is endangered. Anatomical studies focused on understanding the anatomy of the deer most threatened by extinction in South America is a challenge for anatomists, veterinarians and biologists. Research carried out for its conservation has focused mainly on its ecology and pathology, leaving gaps in anatomical knowledge, which is basic and important for a comprehensive understanding of this species. Gross anatomy and radiography of the skeleton of the pelvic limb was performed in three adult Patagonian huemul. Bone specimens of three skeletally mature Patagonian huemul deer were used for gross osteological and radiographic studies. This study was conducted to reveal the morphometric and morphological features of the ossa membri pelvini of the Patagonian huemul. The main findings suggest the presence of powerful extensor muscles in the coxofemoral, femorotibial and tarsal joints, useful during walking, jogging and propulsion in deer. In general, the MNF of Patagonian huemul differ in position with respect to domestic ungulates. In addition, the presence of a notch or obturator canal was observed, with variability in morphology and development among the specimens.

Actualmente, el Huemul Patagónico (Hippocamelus bisulcus) está en peligro de extinción. Los estudios morfológicos centrados en comprender su anatomía han sido un desafío para morfólogos, veterinarios y biólogos. Investigaciones enfocadas en su conservación, se han centrado principalmente en su ecología, patología y en la descripción de sus principales agentes infecciosos, dejando vacíos en el conocimiento anatómico básico, y por ende, su comprensión morfofisiológica. El objetivo de este estudio fue describir la anatomía, morfometría y radiología macroscópica normal y detallada del ossa membri pelvini en tres especímenes de Huemul Patagónico, incluida una interpretación funcional como referencia para uso clínico y conservacionista, investigación biomédica y fines de enseñanza. Los principales hallazgos sugieren la presencia de potentes músculos extensores en las articulaciones coxofemoral, femorotibial y tarsal, útiles durante la marcha, el trote y la propulsión en los ciervos. En general, los forámenes nutricios principales del Huemul patagónico difieren en posición con respecto a los ungulados domésticos. Además, se observó la presencia de una muesca o canal obturador, con variabilidad morfológica y de desarrollo entre los especímenes.

Color-based segmentation vs. stereology: a simple comparison between two semi-automated methods of image analysis for the quantification of collagen / Segmentación basada en colores vs. estereología: una comparación simple entre dos métodos semiautomáticos de análisis de imágenes para la cuantificación del colágeno

Image processing techniques are being widely developed for helping specialists in analysis of histological images and its application is especially useful in obtaining numerical data for the realization of the subsequent statistical analysis. The use of these methods makes the histological analysis of experts more objective and less time-consuming. In this paper we evaluate how well the quantitative methods - color-based image segmentation and stereology - agree on average, and how well they agree for the individuals when they are used to quantify type I and III collagen. Digital images of sections of Salmo salar jaws (5 µm, SiriusRed staining) were analyzed. Collagen quantification was performed by two methods in the same group of images: i) Color Based-Segmentation (K-means algorithm; pixel cluster; ImageJ32 v1.51p) and ii) Stereology (VV; M36; STEPanizer Stereological Tools). They were evaluated 200 images per group. The difference between groups and concordance was analyzed using t-Student (p<0.05) and Blant Altman Comparison Method, respectively. The data analysis of average and individual assessments showed that there is concordance between two methods. In conclusion, stereology and color-based image segmentation are powerful tools which quantify collagen in histological sections.

Las técnicas de procesamiento de imágenes han sido ampliamente desarrolladas para ayudar a los especialistas en el análisis de imágenes histológicas y su aplicación es especialmente útil para obtener datos numéricos para la realización del posterior análisis estadístico. El uso de estos métodos hace que el análisis histológico realizado por expertos sea más objetivo. En este estudio evaluamos qué tan bien coinciden o concuerdan en promedio y entre evaluaciones individuales los métodos cuantitativos "segmentación basada en color" y la "estereología" cuando son utilizados para cuantificar el colágeno tipo I y III. Se analizó imágenes digitales de tejido mandibular de Salmo salar (5 µm, tinción SiriusRed). La cuantificación del colágeno se realizó mediante dos métodos en el mismo grupo de imágenes: i) Segmentación basada en color (algoritmo K-mean, cluster de píxeles, ImageJ32 v1.51p) y ii) Estereología (VV; M36; STEPanizer Stereological Tools). Fueron evaluados 200 imágenes por grupo. Se analizó la diferencia de medias y concordancia entre métodos mediante t-Students (p>0,05) y el Método de Comparación de Blant-Altman. El análisis de los datos de las evaluaciones promedio e individuales demostró que hay concordancia entre los dos métodos. En conclusión, la estereología y la segmentación de imágenes basadas en color son poderosas herramientas útiles para cuantificar colágeno en secciones histológicas.

Effects on the female reproductive system of air pollution produced by the use of wood combustion for residential heating: challenges and perspectives of morphological studies / Efectos sobre el sistema reproductivo femenino de la contaminación del aire producido por el uso de la combustión de madera para calefacción residencial: retos y perspectivas de los estudios morfológicos

Previous studies have shown that air pollution affects cardio-respiratory function, but its role regarding reproductive processes is unknown. There are few experimental background studies on its effects on the morpho-function in the reproductive system. The use of wood combustion for residential heating (WCRH) in the cities of south-central Chile has increased significantly. As a result, it has become a source of significant emissions of particulate matter suspended (PM) in the air. The possible association between exposure to PM and reproductive problems has been suggested only on the basis of epidemiological studies, most of them carried out in environments where the main source of PM emission is the combustion of oil by motorized vehicles and industries, ignoring the effects produced by the smoke of WCRH. For example, in the city of Temuco-Padre Las Casas, Chile, 93 % of PM emissions correspond to WCRH smoke, thus being considered an urban area with a single PM emission source and the factors that contribute to this type of contamination are reasonably representative of most of the cities in south-central Chile. We therefore suggest this as an adequate setting to evaluate the real effect of the environmental contamination produced by the smoke of WCRH in the reproductive system. The limited number of studies reported on the effects of this type of emission on the female reproductive system, present a challenge for the morphological sciences and also for those who make decisions that affect public health.

Estudios previos han demostrado que la polución del aire afecta la función cardio-respiratoria, pero el rol que tiene ésta respecto a los procesos reproductivos es desconocida. Existen escasos antecedentes experimentales sobre sus efectos sobre la morfo-función en el sistema reproductivo. El uso de la combustión de madera para calefacción residencial (WCRH) en las ciudades del centro-sur de Chile ha aumentado significativamente. Como resultado, se ha convertido en una fuente de emisión importante de material particulado en suspensión (PM) en el aire ambiental. La posible asociación entre exposición a PM y problemas reproductivos ha sido sugerida solo en base a estudios epidemiológicos, la mayoría de ellos realizados en ambientes donde la principal fuente de emisión de PM es la combustión del petróleo por vehículos motorizados e industrias, ignorando los efectos producidos por el humo de WCRH. Por ejemplo, en la ciudad de Temuco-Padre Las Casas, Chile, el 93 % de las emisiones de PM corresponden al humo de WCRH, por lo tanto, es considerada como un área urbana con una fuente de emisión de PM única y los factores que contribuyen a este tipo de contaminación son razonablemente representativos a la mayoría de las ciudades en el centro-sur de Chile, lo que permite sugerirla como un ambiente adecuado para evaluar el efecto de la contaminación ambiental producida por el humo de la WCRH en el sistema reproductivo. Los escasos estudios reportados sobre los efectos de este tipo de emisión sobre el sistema reproductivo femenino constituyen un desafío no tan solo para las ciencias morfológicas, sino que además, para quienes toman decisiones que afectan la salud pública.

Quantitative analysis of collagen fibrillar structure in canine uterus exposed to acetate of medroxyprogesterone using second harmonic generation microscopy / Análisis cuantitativo de la estructura de fibras colágenas en útero canino expuesto a acetato de medroxiprogesterona utilizando generación microscópica de un segundo harmónico

Collagen is the most abundant structural protein found in organs and is responsible for providing tissues with structure and function. In order to investigate in canine uteri the potential effect of medroxyprogesterone acetate (MPA) on the changes in collagen deposition were grouped as nulliparous (n=11), multiparous (n=11) and treated with MPA (n=11; nulliparous with two treatments; 5 mg/kg; i.m.). The amount of collagen was studied in the fold and basal regions of the endometrium and myometrium using second harmonic generation with a two-photon spectral confocal microscope, quantified using ImageJ software with a color segmentation plugin, was expressed as fraction area (%) and analyzed by ANOVA (p<0,05). No differences were observed between groups in the fold (p=0,3995) or base (p=0,7392) of the endometrium and myometrium (p=0,1781). In conclusion, our data demonstrate that two doses of MPA (5 mg/kg; i.m.) do not affect the total collagen deposition in canine uteri undergoing contraceptive treatment.

El colágeno es la proteína estructural más abundante presente en órganos y es responsable de proporcionar la sostén y función a los tejidos. Para investigar en caninos el efecto potencial del acetato de medroxiprogesterona (MPA) sobre cambios en el depósito de colágeno en útero, éstos fueron agrupados como nulíparos (n = 11), multíparos (n = 11) y tratados con MPA (n = 11, nulíparos con dos tratamientos 5 mg/kg, im). El colágeno fue evaluado en el pliegue y regiones basales del endometrio y en miometrio utilizando la Generación de un Segundo Harmónico con un microscopio confocal espectral y dos fotones y cuantificado utilizando el software ImageJ a partir de la segmentación de colores. Los resultados fueron expresados y analizados como fracción de área (%; ANOVA; p<0,05). No se observaron diferencias entre los grupos en el pliegue (p = 0,3995) y base (p=0,7392) del endometrio y tampoco en miometrio (p=0,1781). En conclusión, nuestra evidencia demuestra que dos dosis de MPA (5 mg/kg, i.m.) no afectan el depósito total de colágeno en úteros caninos expuestos a tratamiento anticonceptivo.

Quantification of collagen fibers in canine uteri treated with medroxyprogesterone acetate

Collagen plays essential roles in remodeling uterine tissue during decidualization, implantation, pregnancy and involution. To understand whether the progestational agent medroxyprogesterone acetate (MPA) can modify the organization and deposit of collagen in the uteri of normal bitches (Canis Tlupus familiaris), we assessed uterine tissues by histochemistry. Uteri were grouped as: nulliparous (n=11), multiparous (n=11) and treated with MPA (n=11; nulliparous with two treatments; 5mg/kg; i.m.). The amount, location and birefringence of interstitial collagen types I and III in the fold and base of the endometrial stroma and the myometrial muscular layers were studied on sections stained with Picrosirius Red by polarized light microscopy and evaluated by ANOVA. No differences were observed in the endometrium. In the myometrium, differences were observed in collagen type I between MPA-treated and nulliparous uteri vs. multiparous (p<0.05), and differences in collagen type III between nulliparous and multiparous uteri vs. MPA-treated (p=0.0001). In conclusion, two doses of MPA had no significant effect on the investigated collagens in the extracellular matrix.(AU)

Citometría de flujo y sexaje de espermatozoides en animales / Flow cytometry and sperm sexing in animals

Actualmente, cientos de crías se han gestado a través de inseminación artificial conespermatozoides sexados en producción animal. Desde 1992 se utiliza la citometría de flujo, técnica que permite diferenciar espermatozoides X e Y según su contenido de ADN. No existe, hasta el momento, ninguna otra técnica práctica para sexar espermatozoides manteniendo la capacidad fecundante. Los objetivos de esta revisión son explicar: (1) por qué los espermatozoides que contienen el cromosoma X o Y son similaresfenotípicamente, pero a la vez mantienen diferencias entre ellos, (2) los principios y procedimientos utiliza-dos para sexar espermatozoides mediante citometría de flujo y sorting (3) la precisión, velocidad y la eficiencia de los procedimientos actuales de sexaje espermático, (4) el daño espermático ocurrido durante el sexaje espermático y consecuentemente los efectos sobre la fecundidad.

Flow cytometry is a useful technology in the sexed sperm, which measures and analyzes simultaneously, multiple physical characteristics of the cell, as they flow in a stream flow, through a lightbeam. The measured properties are the size of a particle, relative internal granularity, relative complexity and relative fluorescence intensity. Currently, hundreds of calves have been gestated through artificial insemination with sexed sperm in animal production. Since 1992, flow cytometry has been used, a technique that allows spermatozoa X and Y differentiation by DNA content. There is no other practical technique forsperm sexing to keep sperm functionality. The objectives of this review are to explain: (1) why the sperm containing the X or Y chromosome are phenotypically similar, but differ among themselves, (2) the principlesand procedures used for sexing sperm by flow cytometry and sorting ( 3) accuracy, speed and efficiency ofcurrent procedure sperm sexing, (4) sperm damage occurred during sperm sexing and consequently the effects on fertility.

Características planimétricas y estereológicas de los nervios palmar lateral y medial en manos de equinos con y sin síndrome navicular / Planimetric and stereological characteristics of lateral and medial palmar nerves in hands of equine with and without navicular syndrome

El Síndrome Navicular (SN) es una de las patologías claudicógenas mas frecuentes en la práctica clínica equina. Se ha descrito, cierta susceptibilidad individual respecto a ésta presentación clínica, es decir, algunos equinos con SN claudican y otros, con similares hallazgos radiográficos en mano no lo hacen sugiriendo que existen diferencias cuantitativas, entre equinos con y sin SN, en las características de las fibras nerviosas de los nervios periféricos que inervan la mano. El objetivo del estudio fue describir las características morfológicas cuantitativas de los nervios palmar lateral y medial en equinos con SN. Se obtuvo manos mediante un muestreo dirigido y diagnosticadas por inspección visual y evaluación radiográfica. Se conformó dos grupos: "No afectadas" (n= 6) y "Síndrome Navicular" (n= 8). Para determinar diferencias cuantitativos entre ambos grupos se realizó: i) Estudio 1, evaluó las características morfológicas, planimétricas y estereológicas de los nervios palmar lateral y medial, ii) Estudio 2: evaluó la cantidad de axones mielinizados y no mielinizados. En ambos estudios, el análisis de los datos morfológicos, estereológicos y planimétricos, en general, no detectó diferencias significativas entre grupos. En conclusión, los resultados obtenidos en el estudio no entregan evidencia morfológica respecto a diferencias entre nervios palmares entre equinos con y sin SN.

Navicular Syndrome (NS) is one of the most frequent claudicogen pathologies in the equine clinical practice. Certain individual susceptibility has been described in this clinical presentation, that is, some horses with SN halt, while others with similar radiographic findings in hand do not, suggesting that there are quantitative differences, between horses with and without clinical presentation of SN, on the characteristics of the nerve fibers of the peripheral nerves of the hand. The aim of this study was to describe the morphologic quantitative characteristics of the lateral and medial palmar in horses with SN nerves. Hands were obtained by sampling directed and diagnosed by visual inspection and radiographic evaluation. Two groups were formed: "Not affected" (n= 6) and "Navicular Syndrome" (n = 8). To determine quantitative differences between two groups we performed: i) Study 1: evaluated the morphological, planimetric and stereological lateral and medial palmar nerves, ii) Study 2: evaluated the number of unmyelinated and myelinated axons. In both studies, analysis of stereological, morphological and planimetric data generally detected no significant differences between groups. In conclusion, the results of the study do not provide morphological evidence for differences between palmar nerves between horses with and without SN.

Anatomía del segmento prehiliar de la arteria renal en caninos / Anatomy of prehiliar segment of the renal artery in dogs

La literatura anatómica describe, en general, que el riñón canino está irrigado por una arteria renal única. Estudios de campo han demostrado la existencia de variaciones anatómicas en el segmento prehiliar. Esta especie es utilizada como modelo urológico durante el entrenamiento quirúrgico por su fácil obtención, manipulación y tamaño. Estudios han descrito el patrón arterial intra-renal, sin embargo, la anatomía del segmento pre-hiliar de la arteria renal ha sido poco investigada. El objetivo del presente estudio fue describir el patrón arterial renal en el segmento pre-hiliar en caninos. Treinta pares de riñones de caninos fueron disectados y evaluados de acuerdo a 1) número de ramas por arterias renales únicas, 2) altura de origen de las arterias renales, 3) patrones de arteria renal doble y 4) lugar de bifurcación prehiliar de la arteria renal única. La aorta abdominal fue repletada con látex natural y posteriormente se disecó. Se observó arteria renal única y doble en el 90% y 10% de los casos, respectivamente. El número de ramas de la arteria renal única fue dos, tres y cuatro en el 50%, 33,3% y 16,6% de los casos, respectivamente. El origen de la arteria renal derecha se observó craneal, a igual altura y caudal a la arteria renal izquierda en el 80%, 13,3% y 6,6% de los casos, respectivamente. En arterias renales dobles se observó un patrón única-única y única-ramificado en el 33,3%, 66,6% de los casos, respectivamente. La bifurcación de la arteria renal única se observó en el tercio proximal, medio y distal en 8,33%, 29,16% y 62,50% de los casos, respectivamente. El estudio demostró que en la arteria renal y sus ramas no existe un patrón anatómico común descrito en las referencias, al contrario, existe una alta variabilidad anatómica.

The anatomical literature describes, in general, that the canine kidney is supplied by a single renal artery. Different studies demonstrate the existence of anatomical variations in the prehiliar segment. The dog is used as a model for its easy urological collection, handling and size, there are numerous studies of intrarenal arterial pattern, however, there have been few studies on the provision prehiliar segment of the renal artery. The study aimed to describe and standardize the renal artery in dogs. Thirty pairs of canine kidneys were dissected and evaluated according to number of arteries, branches and site of renal artery bifurcation. The abdominal aorta was repleted with natural rubber latex and subsequently dissected. Renal artery was observed and only two in 90% and 10% of cases, respectively. The number of branches of the renal artery was only two, three and four at 50%, 33.3% and 16.6% of cases, respectively. The origin of the right renal artery was observed cranial to the same head and flow to the left renal artery in 80%, 13.3% and 6.6% of cases, respectively. In double renal arteries a unique only-pattern and single-branched was observed in 33.3%, 66.6% of cases, respectively. The bifurcation of the renal artery was observed only in the proximal, middle and distal 8.33%, 29.16% and 62.50% of cases, respectively. The study showed that in the renal artery and its branches there is no common anatomical pattern described in the literature, there is however, a high anatomical variability.

Estudio histoquímico de la distribución de las fibras de colágeno en hueso sesamoídeo distal de equinos con y sin síndrome navicular / Histochemical study of the distribution of collagen fibers on distal sesamoid bone in equine with and without navicular syndrome

La significancia funcional de cualquier relación que exista entre la orientación de las fibras de colágeno y la tensión ejercida sobre una estructura ósea dependerá de la influencia de estos parámetros microestructurales sobre las propiedades biomecánicas del hueso y su capacidad de adaptarse. Se estudió la localización del colágeno en el hueso sesamoídeo distal (HSD) de la mano en equinos con Síndrome Navicular para observar cómo este refleja las demandas biomecánicas ejercidas por la tensión que ejerce el tendón del músculo flexor digital profundo sobre la articulación interfalángica distal. Se utilizaron las tinciones hematoxilina-eosina-azul alcián, y Rojo Picrosirius de Junqueira. La birrefringencia de colágeno óseo fue determinada utilizando microscopía de luz polarizada. La remodelación del HSD resultó en la formación de osteonas secundarias transversales orientados en una dirección lateral a medial y el colágeno óseo se orientó de manera similar. Estos resultados proporcionan evidencia de la existencia de una relación entre la función mecánica de un hueso con su arquitectura, incluso demuestra que esta se extiende hasta el nivel molecular.

The functional significance of any relationship exists between the orientation of the collagen fibers and the strain on a bone structure depend on the influence of these microstructural parameters on the biomechanical properties of bone and its ability to adapt. Localization of collagen was studied in the distal sesamoid bone (DSB) in in equine foot with Navicular Syndrome to see how this reflects the biomechanical demands by the tension exerted by the tendon of the deep digital flexor muscle on the joint distal interphalangeal. Hematoxylin-eosin-alcian blue staining, and Red Picrosirius of Junqueira were used. The birefringence of bone collagen was determined using polarized light microscopy. The remodeling of DSB resulted in the formation of transverse secondary osteons oriented lateral to medial and bone collagen was oriented in similar direction. These results provide evidence for the existence of a relationship between the mechanical function of a bone with the architecture, and shows further that this extends up to the molecular level.

Validación de sybr-14 y 6-cfda para evaluar la viabilidad e integridad de la membrana plasmática en espermatozoides caninos de raza chihuahua / Validation of sybr-14 and 6-cfda to evaluate the viability and plasma membrane integrity in sperm of chihuahua canine breed

En la aplicación de técnicas reproductivas es importante determinar in vitro la capacidad fecundante de los espermatozoides, para ello se utilizan combinaciones de tinciones para evaluar los diferentes parámetros de función espermática, aumentando así la precisión de la estimación de la muestra. El objetivo del estudio fue comparar la efectividad de la utilización de los fluorocromos 6-CFDA y SYBR-14 combinados con PI para determinar la viabilidad e integridad de la membrana plasmática por citometría de flujo. Se utilizó semen fresco de caninos (n=5) de raza Chihuahua, con una concentración espermática >150x106 esp/ml y motilidad progresiva >80%. Tres protocolos fueron ensayados: grupo 1: SYBR-14/PI, grupo 2: 6-CFDA/PI y grupo 3: PI. La integridad de la membrana plasmática de los espermatozoides fue similar entre grupos 1 y 2, independiente del fluorocromo utilizado (37,26±13,9 y 33,8±14,6, respectivamente; p=0,4601). Asimismo, la viabilidad espermática entre los grupos 1, 2 y 3 (62,7±13,9, 66,1±14,6 y 66,4±13,3, respectivamente; p=0,8987). En conclusión, no se evidenció diferencias en la efectividad para determinar la viabilidad e integridad de la membrana plasmática mediante la utilización de SYBR-14 y 6-CFDA, ambas tinciones pueden ser incorporadas al análisis de rutina de semen canino de raza Chihuahua.

In applying reproductive techniques in vitro it is important to determine the fertilizing capacity of the sperm, for this a combination of dyes were used to assess different parameters of sperm function, thereby increasing the accuracy of the estimation of the sample. In dogs (Canis lupus familiaris) Chihuahua breed there is no precedent for evaluating sperm function parameters. The aim was to assess the viability and plasmatic membrane integrity, basic parameters of sperm function. Propidium iodide (PI) was used, a fluorescent dye-specific DNA, which combined with fluorochromes permeable acts as marker of the sperm membrane integrity. The effectiveness of the use of 6-CFDA and SYBR-14 fluorochromes combined with PI was also compared to determine viability and sperm membrane integrity using flow cytometry. Fresh semen of dogs (n=5) Chihuahua breed was used with a concentration of >200x106 sp/ml and progressive motility >80%. Three protocols were performed: group 1: SYBR-14/PI, group 2: 6-CFDA/PI and group 3: PI. The plasma membrane integrity of sperm was similar, independent of the fluorophore used between groups 1 and 2 (13.9±37.26 and 33.8±14.6, respectively, p=0.4601). This also applied to sperm viability between groups 1, 2 and 3 (62.7±13.9, 66.1±14.6 and 66.4±13.3, respectively, p=0.8987). No difference was demonstrated in effectiveness to determine the viability and integrity of the sperm membrane using SYBR-14 and 6-CFDA, both dyes can be incorporated in to routine analysis of semen in canine Chihuahua breed.

Morfometría, planimetría y estereología en el hueso sesamoídeo distal en manos de equinos con y sin síndrome navicular / Morphometry, planimetry and stereology in the distal sesamoid bone in equine foot with and without navicular syndrome

El Síndrome Navicular (SN) es una patología claudicógena bilateral crónica, degenerativa y progresiva, que compromete alhueso sesamoídeo distal (HSD), labolsa podotroclear, ligamentosy a las superficies adyacentes al tendón del músculo flexor digitalprofundo en manos de equinos. La hipótesis de que las características morfológicas del HSD en la mano de equinos varían en aquellos que presentan SN fue evaluada en este estudio. Para determinar cambios morfológicos en el HSD en manos de equinos con SN se realizó un estudio morfométrico, planimétrico y estereológico. Fueron evaluados dos grupos: No Afectadas (n=11) y Síndrome Navicular (n=11). Se evaluaron variables tales como peso, volumen, mediciones lineales, área y parámetros estereológicos tales como densidad de número (NA), volumen (VV) y superficie (SV). Los resultados obtenidos indican que a pesar de existir un proceso patológico e inflamatorio en la región del HSD que induce cambios mesoscópicos y microscópicos atribuibles a SN, no lograrían modificar sus características macroscópicas.

Navicular Syndrome (NS) is a chronic, degenerative and progressive bilateral claudication pathology, compromising the distal sesamoid bone (DSB), the podotrochlear bursa, ligaments and adjacent surfaces of the tendon of the deep digital flexor muscle of equine foot. The hypothesis that morphological characteristics of HSB in hand of horses vary in those with SN was evaluated in this study. A study was carried out to determine the morphological changes in the DSB in 22 left foot of horses with NS. We realized morphometrical, planimetrical and stereological studies in two groups of horses feet: Not Affected (n=11) and Navicular Syndrome (n=11). The following variables were quantified: weight, volume, linear measurements, area and stereological parameters: densities of number (NA), volume (VV) and surface (SV). Results indicate that although there is a pathological and inflammatory process in the region of DSB which induces mesoscopic and microscopic changes attributable to SN, their gross morphological features were not modified.

Criopreservación de espermatozoides caninos a - 80c / Cryopreservation of canine spermatozoa at -80c

La congelación y almacenamiento en nitrógeno líquido (N2L) es la técnica más utilizada para preservar el semen de canino y de otras especies domésticas durante largos períodos de tiempo. Este estudio fue diseñado para validar el uso del ultracongelador de -80C para congelar y almacenar semen canino en pajuelas. Tres protocolos fueron ensayados (n=10): Control: semen congelado y almacenado en N2L; Exp. 1: semen congelado y almacenado -80C, y Exp.2: semen congelado a -80C y almacenado en N2L. Postdescongelación se evaluó por citometría de flujo la viabilidad e integridad de membrana plasmática (SYBR-14/PI), potencial de membrana mitocondrial (DYm; JC-1), integridad de la membrana del acrosoma (PSA/FITC­PI), translocación de fosfatidilserina (Annexin-V-FITC/PI) y fragmentación del ADN (TUNEL). No se observaron diferencias significativas (P<0,05) entre los grupos Control, Exp.1 y Exp.2 respecto a: integridad de membrana plasmática intacta (42,2 ± 5,3; 35,57 ± 10,3 y 40,76 ± 12,1; respectivamente), DYm normal (54,7 ± 20,6; 44,4 ± 15,8 y 43,4 ± 15,3 respectivamente), membrana acrosomal intacta (42,9 ± 11,1; 53,2 ± 15,8 y 48,7 ± 20,1 respectivamente) y ADN fragmentado (0,87 ± 0,41; 0,75 ± 0,16; 0,79 ± 0,27 respectivamente). Sin embargo, el promedio de la motilidad progresiva postdescongelación de los grupos E1 y E2 (37,0 ± 4,4%; 36,8 ± 4,1% respectivamente) demostraron diferencias (P<0,05) respecto al grupo Control (55,9 ± 8,7%). Los resultados obtenidos en el presente estudio demostraron que la utilización del ultracongelador de -80C para congelar y almacenar espermatozoides caninos tiene un uso potencial en medicina veterinaria como alternativa a la utilización del N2L.

The freezing and storage in liquid nitrogen (LN2) is the technique used most for the preservation of canine and other domestic species semen, for long periods of time. This study was designed to validate the use of deep freezer at -80C to freeze and store canine semen in straws. Three protocols were tested (n = 10): Control: sperm frozen in N2L and stored; Exp 1: sperm frozen and stored -80°C, and Exp.2: semen frozen at -80 ° C and stored in N2L. Post-thawing was assessed by flow cytometry and the viability of plasma membrane integrity (SYBR-14/PI), mitochondrial membrane potential (YDm, JC-1), acrosome membrane integrity (PSA / FITC-PI), translocation of phosphatidylserine (Annexin -V-FITC/PI) and DNA fragmentation (TUNEL). No significant differences (P <0.05) between the Control, Exp.2 and Exp.1groups regarding: intact plasma membrane integrity (42.2 ± 5.3, 35.57 ± 10.3 and 40.76 ± 12.1, respectively), YDm normal (54.7 ± 20.6, 44.4 ± 15.8 and 43.4 ± 15.3, respectively), intact acrosomal membrane integrity (42.9 ± 11 , 1, 53.2 ± 15.8 and 48.7 ± 20.1, respectively) and fragmented DNA (0.87 ± 0.41, 0.75 ± 0.16, 0.79 ± 0.27, respectively). However, the average motility of the post-thawing of Exp.1 and Exp.2 groups (37.0 ± 4.4% 36.8 ± 4.1% respectively) showed significant differences (P <0.05) than the Control group (55.9 ± 8.7%). The results obtained in this study showed that the use of deep freezer at -80°C for freezing and storing canine sperm has potential use in veterinary medicine as an alternative to the use of N2L.